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邢建華 陳永芹 紀明霞 朱世光 宮向前
內容提要
目的：觀察人蔘皁甙對直腸癌細胞凋亡的影響。方法:經病理診斷爲直腸癌的患者50例,隨機分爲兩組。治療組35例,對照組15例。治療組術前每天用84.5%的人蔘皁甙40~60ml,保留灌腸4~6h,連續用藥6~8天。對照組用等量生理鹽水同樣方法灌腸。用藥後手術切除腫瘤,術中取新鮮標本,送電鏡檢查。
結果：治療組用藥後,25例便頻、便血、肛墜感減輕,佔71.4%,7例不全梗阻患者腹痛全部減輕;電鏡觀察23例發現凋亡癌細胞,佔65.7%。對照組無上述改變。結論:人蔘皁甙可誘導直腸癌細胞凋亡。
關鍵詞 人蔘皁甙 直腸癌 透射電鏡 細胞凋亡
近幾年發現,人蔘皁甙具有抗腫瘤的作用,並用於肺癌、肝癌、消化道腫瘤等惡性腫瘤的治療。但是,能否引起癌細胞的凋亡目前尚不清楚。我們於1998年6月～2000年9月採用人蔘皁甙保留灌腸治療直腸癌,術後將術中切取的新鮮標本送電子顯微鏡作細胞形態學觀察,發現癌細胞間有明顯凋亡的癌細胞。現報告如下。
資料與方法
1 一般資料 選擇本院腫瘤外科50例直腸癌患者,隨機分爲兩組。治療組35例,男性15例,女性20例;年齡25～77歲,平均(58.2±10.8)歲;病程2～36個月,平均(7.66±6.08)個月。對照組15例,男性7例,女性8例;年齡34～80歲,平均(57.9±11.8)歲;病程1～36個月,平均(8.47±8.26)個月。全部患者均經電子腸鏡診斷爲直腸癌並做病理予以證實。
2 給藥方法 治療組術前每天用人蔘皁甙(遼寧新賓第二製藥廠提供,黃褐色粉末,純度>95%,用時用生理鹽水配成含量爲85.4%的溶液)40～60ml保留灌腸4~6h,連續用6~8天;對照組用等量生理鹽水同法保留灌腸。
3 取材部位及方法 全部患者行直腸癌根治性切除。每例在腫瘤不同部位取材不少於3塊,用2.5%戊二醛及1%鋨酸固定,脫水後用環氧樹脂618包埋,做半薄切片定位。醋酸鈾及枸櫞酸鉛染色,JEM 1200EX型透射電鏡觀察。每例不少於2個銅網。
結 果
1 治療組在用人蔘皁甙灌腸後25例(71.4%)患者自覺症狀好轉,如便頻、便血、肛墜感減輕,7例不全梗阻的患者腹痛全部減輕。對照組上述症狀無改變。
2 電鏡觀察結果 對照組:癌細胞形態不規則, 細胞核有畸形,可有深凹陷,常染色質及核仁突出;胞漿內見豐富的線粒體、粗麪內質網及高爾基體,部分癌細胞胞漿內見粘液顆粒,並可見壞死的癌細胞,未觀察到凋亡的癌細胞。治療組:大部分癌細胞的超微結構形態與對照組相似,但在癌細胞間明顯可見凋亡的癌細胞。凋亡癌細胞早期改變爲細胞電子密度增加,染色體凝聚,在覈膜下半月形或花瓣狀團塊；進一步發展爲細胞皺縮,直徑變小,細胞表面突起,似出牙現象,與周圍細胞分離；細胞核固縮呈不規則黑洞狀,核膜不完整或消失；但細胞膜、內質網及線粒體等細胞器結構完整。凋亡細胞被巨噬細胞吞噬。35例中23例(65.7%)發現凋亡的癌細胞。
討 論
細胞凋亡是單個細胞受內在的基因編程的調節,通過主動的生化過程而自殺死亡的現象。英國生物學家Keer等(1)在1972年首先提出細胞凋亡的概念。目前許多的化療藥物如拓樸異構酶的抑制劑、烷化劑、抗代謝劑和激素拮抗劑,都可在不同類型的敏感腫瘤細胞中誘導凋亡。腫瘤細胞對凋亡的敏感性,也許是決定化療效果的關鍵因素。對腫瘤細胞凋亡的誘導率已成爲評價抗腫瘤藥物療效的指標(2)。
中藥丹蔘根部的乙醇提取物-丹蔘酮ⅡＡ可誘導HL60細胞凋亡(3)。綠茶水提取物能誘導體外培養的大腸癌LOVO細胞的凋亡(4)。大蒜素可誘導人Ｔ淋巴細胞白血病細胞株凋亡(5)。人蔘皁甙有抗腫瘤作用,對大腸癌敏感(6)。但能引起癌細胞凋亡目前尚未見報道。本研究發現人蔘皁甙可誘導直腸癌細胞凋亡。人蔘皁甙灌腸後,藥物在腸腔內保持高濃度,使腫瘤浸泡在藥物中。通過局部的吸收,最快發生藥物的治療作用,效果較好。大部分患者在用藥後,便頻、便血、肛墜感減輕。有不全梗阻的患者腹痛症狀減輕。癌組織切片經電子顯微鏡觀察可見細胞濃縮、體積變小、胞膜突起、細胞漿中細胞器密集及DNA斷裂形成凋亡小體。對照組的患者臨牀症狀無改善。電鏡可見壞死的癌細胞,未觀察到凋亡的癌細胞。
國外多采用化學藥物來誘導癌細胞凋亡。但是,由於化學藥物本身具有一定毒性,它除能夠誘導癌細胞凋亡外,對機體正常細胞和組織也能帶來嚴重損害。因而,尚未在臨牀廣泛推廣應用。人蔘皁甙副作用小,用法簡單,對誘導直腸癌細胞凋亡有較好作用,臨牀可廣泛應用。
參考文獻
1．Keer J F，Wyllie A H，Currie AR．Apoptosis；abasic biological phenomenon with wide ranging implication intissue kinetics．Br J Cancer 1972；26(2)；239
2．Donnel T J；Meyn Re，Robertson L.E.Implication of apoptotic cell death regulation in cancer therapy．Semin Cancer Biol 1995；6；53
3．黃韌敏，袁淑蘭，宋 毅，等．.丹蔘酮ⅡA誘導HL60細胞凋亡．癌症1998；17(3)∶164—166．
4．譚曉華，張亞歷，周殿元，等．綠茶水提取物誘導體外培養的大腸癌LOVO細胞的凋亡．癌症1998；17(3)∶171—174．
5．俞超芹，凌昌全，潘瑞萍，等．大蒜素誘導人T淋巴細胞白血病細胞株凋亡的實驗研究．中醫雜誌1999；40(5)∶307—308．
6．邢建華，仲崇斐，王曉傑．人蔘皁甙對胃腸腫瘤敏感性測定的實驗研究．中國藥學雜誌2000；35(4)∶273—275．