乙肝病毒基因變異對兩對半檢測結果的影響

乙肝病毒基因變異對兩對半檢測結果的影響
乙肝兩對半是乙肝病毒HBV在血清中的5種標誌物,對其5個項目的檢測是目前臨牀分析和判斷乙肝患者病程和傳染性的重要依據之一.臨牀中發現由於檢測方法的限制,當HVB基因出現變異時,可使乙肝5項中的某個項目,在HBV感染後,本應是陽性的檢測結果,變爲陰性,這樣就造成了不但不能給臨牀提供正確的信息,而且有時會引起誤診,以致延誤治療.
一,基因結構:HBV是脫氧核糖核酸病毒,它的雙股環狀DNA由長短兩股組成.長股DNA核苷酸序列上含有4個開放讀碼框架,分別稱爲S,C,P,X區.S區又分前S1(preS1),前S2(PRES2)兩區及S基因,其中的S基因編碼乙肝表面抗原.C區基因中有前C基因及C基因,分別編碼乙肝E抗原及核心抗原.(HBcAg).
二, 影響和結果:研究發現,當HBV基因發生變異(如點突變,鹼基缺失,插入等)時,可對其在血清中的五種標誌物的檢測產生如下的影響和結果:
1,S系統(HBSAG,抗-HBS).HBV-DNA:S區中的S基因編碼(即轉錄翻譯)HBSAG,它是人類最早發現的HBV標誌物,當HBV-S基因變異時,血清中HBSAG呈陰性.而HBSAG在HBV感染後出現最早(即陽性),然而它是臨牀最常用的HBV感染的間接指標.因此檢測HBSAG陰性,常被誤認爲沒有感染HBV,造成HBSAG陰性的HBV感染患者不能被及時確診.如果這些人接種乙肝疫苗,由於已感染上HBV,所以他們的體內不會出現抗-HBS.
2,E系統(HBEAG,抗HBE):HBV-DNA:C區基因中有2個AUG,分別在1814與1901核苷酸,1901位置的AUG是起始密碼,而在1814與1901核苷酸間區爲前C(PREC)區,對HBEAG的表達和分泌很重要.PREC區沒有終止密碼,HBV-PREC基因與C 基因共同編碼HBEAG(如果僅由C 基因編碼,則爲HBCAG).HBEAG由於與HBV的消長基本一致,所以是臨牀中最常用的反映HBV活動性地複製和傳染性強的指標.它可刺激機體產生E抗體,此抗體對HBV感染有一定的保護作用,它的出現是HBV感染進入後期,病毒複製變弱,傳染性降低的指標.而HBV的PREC基因不能與C基因共同轉譯出HBEAG,這就造成HBV感染後HBEAG的缺失.變異的病毒株因不產生HBSAG,就不能被抗-HBE及相應的細胞免疫所識別而清除,故HBV變異株可以在抗-HBE陽性的情況下,仍然大量複製增殖.這些人雖然HBEAG陰性,但因爲HBV複製活躍,傳染性強,所以最容易引起誤診而延誤治療.例如在臨牀上常見的乙肝5項檢測爲"小三陽"的乙肝患者,本來根據化驗結果,臨牀意義應是HBV複製弱,傳染性低,但在HBV-前C基因變異的情況下,它所反映的病情卻恰恰相反(當然這種情形只有少數).
3,核心抗原,抗體系統(HBCAG,抗-HBC) HBV-C基因編碼HBCAG,乙肝5項中它的免疫原性最強(比HBSAG要強的多),可誘使機體產生相應的抗體---核心抗體(抗-HBC).而它是HBV感染後血中最早出現的標誌性抗體,幾乎所有個體在感染HBV後都能產生抗-HBC,故它是乙肝滸病學調查的良好指標.當HBV-C突變後,HBCAG變異,產生了與它相應的變異的抗-HBC,,以至於目前的檢測方法(用已知的正常HBCAG去檢測與它相應的正常抗體)不能檢測到,出現假陰性的結果,從而也會影響到對HBV感染的確定.
由上可知,當HBV基因出現變異時,可影響HBV感染的確定.例如可造成HBSAG陰性的HBV感染者不能確診,使乙肝疫苗注射者不能產生抗-HBS,使"小三陽"患者不再"安然無恙".當然,絕大多數乙肝患者血中的HBV是正常病毒,變異的病毒與正常病毒相比並不多見,但由於容易引起誤診,所以應引起足夠的重視.
另外,從上面還可以看出,當HBV基因變異時,可出現一些不常見的乙肝5項的檢驗結果.就拿在急性乙肝和慢性活動乙肝患者中最常見的"大三陽"來說,當基因變異時可出現:1HBV-S變異時,HBEAG,抗-HBC陽性;2,HBV-PREC基因變異時,HBSAG,抗-HBC陽性;3,HBV-C基因變異時,表面抗原,E抗原陽性等三種類型的化驗結果,其中有二種不常見的組合形式.這還只是在只有一種常見檢驗結果,只發生一種變異時的情形,而工作中的實際情況,卻是乙肝5項有多種常見類型的檢驗結果和可能不止一種的變異,所以乙肝5項中5個項目的組合方式會更復雜.這就提示我們,當出現不常見的結果時,應考慮到有可能是基因變異引起的,並進行鑑別診斷.
三,鑑別診斷:乙肝5項只是判斷HBV感染和傳染性的間接指標,且由於目前檢測方法的侷限,容易出現假陰性的結果,所以在臨牀中不要過分依賴它的檢測結果,要重視其它反映HBV感染的指標,如肝功能,尤其是HBV-DNA的檢測.
我們知道,只有HBV-DNA纔是HBV感染的最直接,特異和靈敏的指標.HBV-DNA的檢測,有定性,定量二種方法,多用於HBV感染的確定和抗病毒藥物療效的考覈.檢測HBV-DNA陽性,表示有HBV存在;檢測血中HBV-DNA含量的變化,可知病毒有無複製能力,是否在增殖.例如在臨牀上,慢性乙肝治療終點的血清學標誌就是HBV=DNA的消失.而且,由於它檢測的是HBV核苷酸序列中的高度保守區(不易出現變異的基因),所以檢測HBV-DNA時,不受上述基因(HBV-S,PREC,C)變異的影響,即HBC感染人體後,在體內複製時,即使由於基因變異造成乙肝5項中某個項目假陰性,HBV-DNA的檢測結果都是陽性.因此,HBV的複製,傳染性和考覈藥物療效時應將檢測乙肝5項和HBV-DNA等結合起來.